پاور کشت بافت

  • دانلود پاورپوینت با موضوع کشت بافت

    برای دریافت اینجا کلیک کنید



  • دانلود جزوه مبانی کشت بافت - دکتر مهدی شاهسوند

    این جزوه بسیار مفید تالیف دکتر مهدی شاهسوند می باشد که در آن جدید ترین متد های کشت بافت شرح داده شده است جهت دریافت فایل بر روی لینک زیر کلیک کنید: دانلودلینک منبع  

  • تاریخچه کشت سلول

    تاریخچه کشت سلول<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /> آغاز کشت سلول یا کشت بافت به قرن نوزدهم زمانی که بررسی روی جزئیات بافت و اعضای ارگانهای بدن در ظرف شیشه ای آغاز شده بود، برمی گردد. در سال1885 شخصی به نام رکس توانست تا مدتی سلولهای جنین جوجه را در سرم فیزیولوژی نگهداری کند که البته نمی توان کشت سلول نامید. در اواخر قرن نوزده روشهایی به منظور نگهداری اسپرم به صورت منجمد جهت تلقیح مصنوعی چهارپایان ارائه گردید. در سال1907 هریسون برای اولین بار توانست فیبرعصبی جنین قورباغه را در ظرف حاوی لنف قورباغه نگهداری کرده و نشان دهد که اگزونهای فیبر عصبی منشعب می گردند. در سال 1912 کارل توانست سلولهای بافت پیوندی را به مدت طولانی کشت دهد. در سال 1948 سانفورد و همکارانش اولین کلون سلول L را تهیه نمودند. در سال 1952 گی و همکارانش از سرطان رحم، اولین لاین سلول انسانی به نام هلا را بدست آوردند. در سال 1954 هیسمن و ابرکرومبی پدیده ممانعت تماسی بین سلولهای فیبروبلاست را تشریح کردند. در سال 1955 ایگل و بعدها دیگران قادر شدند محیطهای کشت مناسب، فاکتورهای اتصال و لایه تغذیه کننده برای سلول را شناسایی کنند. در سال 1961 مورهد و هی فلیک عمر فناناپذیر سلولهای دیپلوئید انسانی را شرح دادند. در سال 1962 بوناسیسی و همکارانش روشهایی برای نگهداری سلولهای مشتق از منشأ توموری ارائه دادند. در سال 1968 یافته تمایز میوبلاستهای طبیعی را در شرایط آزمایشگاه(in vitro) مطالعه کرد.  در دهه 70 روشهای رشد سلولهای خاص در محیطی حاوی  ترکیبات شیمیای ارائه گردید و گاردونساتو و همکارانش احتیاجات سلول به فاکتور رشد پروتئینی، فاکتورهای اتصال نظیر گلیکوپروتئینهای با وزن مولکولی بالا در ماتریکس خارج سلول و هورمونهایی نظیر انسولین و فاکتورهای رشد شبه انسولینی را تشریح کردند. در سال 1979ساتو و بوتون استین ترکیبات محیط کشت بدون سرم برای سلول عصبی را مشخص نمودند. و بعدها تحقیقات زیادی با استفاده از کشت سلول گسترش یافت.

  • امتزاج پروتوپلاست و كاربرد آن در اصلاح نباتات

    فهرست مطالب عنوان                                                                                صفحه چکیده............................................................................................... 1 مقدمه............................................................................................... 2 تاریخچه........................................................................................... 3 فصل اول:................................................................................................... 10  بررسی امتزاج پروتوپلاسمی.................................................................... 11 1-1-امتزاج پروتوپلاست و تبادل سیتوپلاسم‌ها  ............................................. 11 2-1-امتزاج پروتوپلاست و نوترکیبی ژنومهای پلاست........................................ 11 3-1-امتزاج پروتوپلاست و نوترکیبی ژنوم‌های میتوکندریایی............................... 12 4-1-کاربرد امتزاج رویشی در دستکاری گونه‌های زراعی.................................. 12 فصل دوم:بررسی روش‌های القاء امتزاج......................................... 17 1-2- امتزاج خود به خودی..................................................................... 18 2-2-روش القا امتزاج با پلی‌اتیلن گلیکول (PEG) .......................................18 3-2-استفاده از نیتریت سدیم................................................................... 19 4-2-استفاده از کلسیم و PH بالا.............................................................. 19 5-2-روش‌های مصون‌سازی....................................................................... 19 6-2-امتزاج مکانیکی............................................................................... 20 7-2-امتزاج الکتریکی............................................................................... 20 8-2روش‌های دیگر:................................................................................. 20 1-8-2 کلکسیون مشاهده‌ای.................................................................... 21 2-8-2نشان‌های فلورسانی.................................................................... 21 3-8-2-استفاده از دستگاه سورت كنندسلولي فعال شده با فلورسانس............. 22 4-8-2سلکیسون با توجه به مواد غذایی....................................................... 22 5-8-2حساسیت به نور............................................................................ 22 6-8-2حساسیت به دارو و مقاومت ............................................................ 22 جداسازی و امتزاج پروتوپلاست...................................................... 23 9-2روش مکانیکی.............................................................................. 24 10-2روش آنزیمی................................................................................... 24 11-2وضعیت فیزیولوژی بافت‌ها و سلول ها............................................... 25 12-2تعدیل کننده فشار اسمزی................................................................ 27 13-2خالص سازی پروتوپلاست............................................................... 28 14-2قابلیت حیات و تراکم پروتوپلاست.................................................... 29 15-2تکنیک های کشت......................................................................... 30 16-2کشت مایع.................................................................................... 31 17-2محیط کشت.................................................................................. ...

  • سیاهک آشکار Ustilaga tritici

      سیاهک آشکار Ustilaga tritici     دریافت مقاله شماره ۷  فایل پاور پوینت           سیاهک آشکار                                                       مقدمه گندم از اولین گیاهانی است که به دست بشر کشت شده و دانه آن غذای اصلی اغلب مردم جهان می باشد. در ایران مصرف  سرانه گندم حدود 150کیلوگرم می باشد و50% پروتئین مورد نیاز هر فرد ایرانی از آن تأمین می شود و از اینجا اهمیت زراعت گندم در تأمین غذای مردم و ضرورت حمایت از تولید این محصول پرارزش مشخص می گردد. بیماری قارچی موسوم به سیاهک آشکار یکی از بیماریهای عمده در نواحی مرطوب یا نسبتا مرطوب می باشد ولی خسارت آن نسبت به سیاهک پنهان گندم در درجه دوم اهمیت قرار دارد.   تاریخچه سیاهک آشکار گندم یکی از بیماریهای عمده در نواحی مرطوب و یا نسبتا مرطوب می باشد. اولین گزارش کتبی در مورد سیاهک های غلات مربوط به تئوفراستوس 332 تا 387 سال قبل از میلاد مسیح است. سیاهک برای رومیان باستان شناخته شده بود و آن را اوستیلاگو می نامیدند. این نام از کلمه لاتین سوزاندن مشتق شده است. به کارگیری این واژه بعدها در بسیاری از زبان های دنیا برای سیاهک متداول شد (مثلا carbon, carbone, sot, brand). شرح نشانه ها با نظریه های اولیه در مورد عامل بیماری سیاهک آشکار غلات مغایرت دارد. نظریه هایی مانند: تخمیر و خشک شدن شیره گیاهی زیاد که تصور می شد در بعضی خاک ها با شرایط آب و هوایی خاص افزایش می یابد، خشم خدایان یا عوامل شیطانی، نفرین همسایگان بدخواه، شومی ستارگان ماه و خورشید و فرضیه به وجود آوردن خود به خود بیماری در بافت گیاهی را می توان نام برد. این نظریه ها تا سال 1800 یعنی تا زمانی که علل واقعی بیماری غلات شناخته شد با ارزش بود ولی از آن به بعد ارزش و اعتبار خود را از دست داد. در سال 1890 ثابت شد که سه گونه مشخص قارچ باعث سیاهک های آشکار گندم، جو و یولاف می شوند و به زودی معلوم شد که از طریق تخمدان آلوده می شود. در ایران این بیماری ابتدا در سال 1326 گزارش و تشریح شد.    اهمیت و انتشار بیماری: این بیماری در تمام مناطق کشور وجود دارد ولی خسارت آن نسبت به سیاهک پنهان گندم در درجه دوم اهمیت قرار دارد، در حالیکه هر گیاه مبتلا از نظر محصول دهی بی ارزش به حساب می آید، لذا در صورت شیوع بیماری خسارت وارده به محصول بسیار شدید می باشد. سیاهک آشکار گندم ustilago tritici(persoon) Rostrup  هرجا که گندم Triticum.aestivum وTriticum.turgidum   کشت شود وجود دارد. عامل بیماری بذرزاد است. به همین دلیل بشر آن را از یک منطقه به منطقه دیگر انتشار می دهد و به ندرت از طریق هوا در فواصل دور منتشر می شود.(Ustilago.Tritici)سیاهک آشکار  قبلا در آمریکا، استرالیا و جنوب آفریقا وجود نداشت ولی ...

  • محاسبه بار میکروبی شیر ((Total Count

    <?xml:namespace prefix = v ns = "urn:schemas-microsoft-com:vml" /><?xml:namespace prefix = w ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:word" />محاسبه بار میکروبی شیر ((Total Count<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /> مواد و وسایل مورد نیاز: 1)سرم فیزیولوزی 8.5 کرم نمک در یک لیتر آب مقطر 2)نمونه شیر  3) پیپت استریل  4) لوله آزمایش  5) پلیت استریل 6)محیط کشت پلیت کانت آگار 7) اتو کلاو  8)فور   روش آزمایش  در 7 لوله ازمایش مقدار 9 میلی لیتر سرم فیزیولوزی ریخته و اتو کلاو می نماییم.پس از سرد شدن 1 میلی لیتر از نمونه شیر را در لوله اول می ریزیم.سپس به میزان 1 میلی لیتر از لوله اول برداشته در لوله دوم ریخته و به همین ترتیب تا لوله آخر ادامه داده تا رقتهای مورد نظر ایجاد شود. جهت  شمارش بار میکروبی شیر یاTotal Count   از هر کدام از رقتها یک میلی لیتربه طور جداگانه برداشته و  بصورت Pure Plate کشت می دهیم ( با پیپت استریل یک میلی لیتر برداشت نموده ودر پلیت استریل ریخته و  داخل هر پلیت از محیط کشت استریل شده پلیت کانت آگار که نزدیک به انعقاد می باشد با دمای حدود50-40 درجه سانتی گراد می ریزیم.) و در دمای 31 درجه سانتیگراد به مدت 3 روز انکوبه می نماییم.تعداد کلنی هارا شمرده و میانگین شمارش شده رادر رقتهای مختلف محاسبه و بعنوان بار میکروبی شیر Total Count منظور می نماییم. عکس رقت × عکس میزان تلقیح × تعداد کلنی X=   نکات مهم :        باید در هر مرحله از پیپت استریل جدا استفاده نماییم.       بهتر است جهت شمارش دقیقتر از هر رقت از دو پلیت جهت کشت  Pure Plate استفاده نماییم.

  • بهبود سريع گياهان زراعي با استفاده از روش کشت بافت

    مقدمه:در طول سه دهة گذشته، پیشرفت اصلی در تولید گیاهان زراعی خوراکی با استفاده از کاربرد کود، آبیاری، آفت کش، علف کش، مکانیزاسیون و ارقام اصلاح شدة زراعی بود. تمام این عملیات به استثناء آخرین تغییرات محیطی اعمال شده جهت متناسب ساختن آن برای گیاهان، بطور کامل در مناطقی از جهان که بهبود کشاورزی توسط این روش ها عیناً صورت گرفته است. بعلاوه، افزایش هزینة انرژی موانع بسیار شدیدی جهت کاربردشان در کشورهای کمتر توسعه یافته ایجاد می کند، و در آینده حتی ملت های صنعتی نیز ممکن است هزینه هایشان را بازدارنده تلقی نماید. یک راه برای کاهـش این هـزینه ها و برای ادامـه دادن به تولید غذا این است که ارقام جدید گیاهی را تولید کنند که به تغییرات محیطی کمتری نیاز داشته و بطور اختصاصی برای محیطهای محلی توسعه یافته باشد.اصلاح کنندگان ارقام گیاهی جدیدی را با الحاق آللهای جدید مفید یا ترکیبات آللی در داخل خزانة ژن ارقام مورد کاشت تولید نمودند. بطور سنتی، اینکار یا بوسیلة اصلاح ارقام اهلی یا وحشی موجود، یا با انتخاب موتانتهای خودبخودی یا القاء شده حامل صفات مطلوب صورت می گیرد. هرگاه صفات خاصی را در یک گیاه توسط هر کدام از روش ها جدا کنیم، آسانی کار برای اصلاح گیاه به پروسة گشنیده شدن یک گونة گیاهی خاص بستگی خواهد داشت. در گونه های خود گشن صفت به آسانی در گیاهان تکثیر شده استقرار پیدا می کند. در گونه های دگرگشن معرفی یک صفت جدید کند و دشوار می باشد.ارقام اهلی یا وحشی دگرگشن می تواند بالقوه چندین ژن جدید را به بهترین ژنوتیپ موجود اضافه نماید، ولی به چندین نسل اصلاحی برای تثبیت تنوع دگرگشنی حاصله مورد نیاز می باشد. بعلاوه، حمل صفت مطلوب توسط رقم اهلی و یا وحشی امری غیر معمولی نیست. انتخاب موتانت های خودبخودی و یا القاء شده می تواند نیاز به تثبیت را معلوم سازد و ابتدائاً برای افزایش یک ژن در یک زمان به یک ژنوتیپ بکار رفته است. در حالیکه، چندین مورد معایب منطقی و اقتصادی برای این روش نیز وجود دارد.در اثر میزان کم موتاسیون (در 1000000تا100000000 فقط یک گیاه دارای موتانت خودبخودی برای یک صفت مطلوب خواهد بود)، جداسازی موتانتهای خودبخودی از گیاهان رشد یافته در مزرعه نیاز به آزمون تعداد زیادی از گیاهان دارد. این به نوبة خود درگیر با مقدار زمان اجرایی و دشواری کار بسیار زیاد، که همه با هزینه های بسیار بالا هم همراه هستند می باشد. در روش های انتخاب برای کاهش عملیات بیشتر از قلمه ها استفاده می کنند تا گیاهان رشد یافته در مزرعه. به هر حال قلمه ها در مقایسه با گیاهان بالغ به شکل های متفاوتی به یک عامل انتخابی پاسخ می دهند. بعلاوه صفات مطلوب ...

  • انواع کشت

      انواع کشت باکتری <?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /> <?xml:namespace prefix = v ns = "urn:schemas-microsoft-com:vml" /><?xml:namespace prefix = w ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:word" />  کشت خطی : در این روش باکتری بر روی محیط کشت با حرکت آنس پخش می شود .در مرحله اول برای کشت باکتری نا شناخته حتما باید از این کشت استفاده کرد . بعد از این مرحله برای گرفتن تک کلنی از کشت به روش سوزانیدن استفاده می نماییم.   کشت به روش سوزانیدن: باکتری بصورت 4 منطقه در روی پلیت کشت می گردد. ابتدا با آنس  استریل مقداری از پرگنه را برداشته و بصورت چند خط در یک چهارم  سطح اگار  کشت می دهیم.مجددا آنس را استریل نموده ودر یک چهارم دیگر بصورت چندین خط ، بطوریکه از محله قبل نیز عبور نماید کشت داده، مجددا آنس را استریل نموده و در یک چهارم دیگر سطح آگار این عمل را تکرار می نماییم. در پایان بدون اینکه انس را استریل نماییم در یک چهارم آخر سطح آگار هم کشت می دهیم . (شکل4)