آزمایش آمینواسیدها

تست عمومی: از 20 نوع آمینواسید به 19 تا پاسخ می دهد, به یکی پاسخ نمی دهد.

آزمایش نین هیدرین Ninhydrin test

واکنش اسیدهای آمینه با نین هیدرین یک جنرال تست است. زیرا تمام اسیدهای آمینه و پروتیین ها با این ترکیب واکنش می دهند.

مواد لازم

1- محلول 1/0 درصد اسیدهای آمینه مختلف در آب مقطر

2- محلول آلبومین یا سفیده تخم مرغ در آب

3- محلول نین هیدرین

1 گرم نین هیدرین را در 10ml اتانل حل کرده با آب مقطر به 50cc می رسانیم.

اساس آزمایش : نین هیدرین سبب د آمینه شدن و د کربوکسیله شدن اسیدهای آمینه می شود.

در نتیجه الدئیدی که یک کربن کمتر از اسیدآمینه مولدش دارد به وجود می آید.

نین هیدرین اکسید شده در مجاورت NH3 تولید شده با نین هیدرین احیاشده تولید کمپلکس رنگی می کند.

روش آزمایش

به تعداد اسیدهای آمینه و پروتیین که در اختیار دارید لوله آزمایش انتخاب کنید. در هر لوله 1ml از اسیدآمینه یا پروتیین و 1ml محلول نین هیدرین می ریزیم. در لوله دیگر آب و نین هیدرین می ریزیم. تا نتایج را با شاهد مقایسه نماییم.

برای آزمایش از سه نوع آمینواسید (پرولین, گلوتامیک اسید, تیروزین) استفاده می کنیم. لوله های حاوی محلول را به مدت 30 دقیقه درون دستگاه بن ماری قرار می دهیم.

نتیجه : گلوتامیک اسید , و تیروزین ارغوانی رنگ می شوند. به نین هیدرین پاسخ می دهند. فقط پرولین به این معرف پاسخ نمی دهد و همانند لوله شاهد زرد است.

آزمایش بیوره Biuret test

این آزمایش فقط به ترکیباتی که حداقل دارای دو پیوند پپتیدی باشند جواب می دهد.

می توان به کمک این آزمایش اسیدهای آمینه را از پروتیین ها تشخیص داد.

تشکیل رنگ در این واکنش به دلیل تولید کمپلکس بین Cu++ موجود در معرف و ازت موجود در زنجیره پلی پپتید است.

مواد لازم

1- محلول های آمینواسیدی ( کازئین, گلوتامیک اسید)

2- معرف بیوره (آبی رنگ است چون سولفات مس) دارد.

روش آزمایش

2 لوله آزمایش برمی داریم. درون یکی 2ml کازئین و درون دیگری 2ml گلوتامیک اسید می ریزیم. درون لوله ها 2ml معرف بیوره اضافه می نماییم.

مخلوط می کنیم و درون بن ماری جوش قرار می دهیم.

نتیجه : کازئین ارغوانی رنگ می شود. به بیوره پاسخ می دهد. گلوتامیک اسید پاسخ نمی دهد. رنگش تغییر نمی کند.

آزمایش جهت تشخیص وجود گوگرد در اسیدآمینه یا پروتیین sulfur test

گوگرد موجود در پروتیین به صورت گروه سولفیدریل, در اسیدآمینه سیستئین به صورت دی سولفاید دیده می شود. گوگرد مربوط به سیستئین به راحتی با سود به صورت Na2S درمی آید که در حضور استات سرب رسوب Spbرا ایجاد می کند.

مواد لازم

1- محلول های آمینواسیدی ( سیستئین, تیروزین)

2- محلول استات سرب 5%

3- محلول NaOH 10%

روش آزمایش

2 لوله آزمایش برمی داریم. درون یکی 2ml سیستئین و درون دیگری 2ml تیروزین می ریزیم. درون لوله ها 5mlسدیم هیدروکسید اضافه می نماییم.

لوله ها را به مدت 15 دقیقه در بن ماری جوش قرار می دهیم. هنگامیکه لوله ها را از بن ماری خارج نمودیم به هر کدام 10 قطره استات سرب اضافه نموده و صبر می کنیم.

نتیجه : کاغذ سفیدی را پشت لوله ها می گیریم تا تشخیص آسان تر شود. لوله حاوی سیستئین خاکستری رنگ می شود. به سیستئسن پاسخ می دهد. به تیروزین پاسخ نمی دهد.

واکنش پاولی

حلقه فنولی و ایمیدازولی با ترکیب دی آزوئه اسید سولفانیلیک در سرما واکنش کرده, کمپلکس قرمز رنگ ایجاد می کنند.

مواد لازم

1- محلول های آمینواسیدی ( هیستیدین, گلوتامیک اسید)

2- محلول 10g.Lسولفانیلیک اسید در اسید گلریدریک 1 مولار

3- محلول نیتریت سدیم NaNO2

4- محلول کربنات سدیم Na2CO31 مولار

روش آزمایش

2 لوله آزمایش برمی داریم. درون یکی 2ml هیستیدین و درون دیگری 2ml گلوتامیک اسید می ریزیم. به هر لوله 2ml نیتریت سدیم اضافه نموده و در ادامه 1ml سولفانیلیک اسید می افزاییم. سپس 1قطره کربنات سدیم 1مولار ,برای قلیلیی نمودن, اضافه می کنیم.

نتیجه : هیستیدین قرمز رنگ می شود.

تست گزانتوپروتئیک اسید

مواد لازم

1- محلول های آمینواسیدی ( تیروزین, گلوتامیک اسید)

2- HNO3 غلیظ

3- سود 10 درجه

روش آزمایش

2 لوله آزمایش برمی داریم. درون یکی 2ml گلوتامیک اسید و درون دیگری 2mlتیروزین می ریزیم. به هر لوله 5قطرهHNO3 غلیظ اضافه می نماییم. لوله ها را درون بن ماری جوش قرار می دهیم, تا زرد رنگ شود.

پس از آن به هر لوله قطره قطره سود 10 درجه غلیظ می افزاییم تا نارنجی رنگ شود.

نتیجه : لوله ای که نارنجی شود حاوی تیروزین است.

آزمایش آمینواسیدها

مطالب مشابه :

نمونه.سوال.مبانی.مهندسی.برق.با.پاسخ.تشریحی.و.تستی

آزمایش قندها

نمونه سوال اندیشه اسلامی 2 با پاسخنامه تستی

(سلول بنیادی)stem cell

آزمایش آمینواسیدها

كاربرد مواد نانو در صنعت بتن

آشنايي با قلعه فلک الافلاک - خرم آباد

اصطلاحات نگهداری و افزودنیهای مواد غذایی