two-dimensional elechtrophoresis
سلام نوبتیم که باشه نوبت ۲تا بعد الکتروفورز دو بعدیه...
همون طور که قبلا اشاره کردیم طی الکتروفورز 2 بعدی پروتئین ها بر اساس نقطه ایزوالکتریک و در مرحله بعد براساس جرم ملکولی شان از هم تفکیک میشوند.
ابتدا باید3 موضوع رو تعریف کنیم:
1-نقطه ایزوالکتریک: PHاست که در آن بار خالص پروتئین برابر با صفر است.
2-آمفولیت: الکترولیت آمفوتر هستند.
3-آمفوتر:به اسیدهای آمینه با وزن ملکولی پایین گفته میشود که درمحلولهای آبی خاصیت دو قطبی نشان می دهند.
بعد اول: ایزوالکتریک فوکوسینگ
این روش برای تعیین نقطه ایزوالکتریک یک پروتئین نیز بکار می رود.
با اختلاط بازها واسیدهای آلی دارای وزن ملکولی پایین و انتشار آن ها در میدان الکتریک ایجاد شده در عرض ژل ،یک شیب PHبوجود می آید .وقتی مخلوط پروتئین در این شیب قرار داده می شود هر پروتئین برای رسیدن به PHبرابر PIبا خود در داخل ژل حرکت می نماید به این ترتیب پروتئین های دارای نقاط ایزوالکتریک مختلف بطور متفاوت درداخل ژل انتشار می یابد.
این روش برای تعیین نقطه ایزوالکتریک یک پروتئین نیز بکار می رود.
بعد دوم:SDS-PAGE
ژل به دست آمده از مرحله اول 90 درجه چرخانده میشود و روی صفحه SDS-PAGEقرار می گیرد.
در این بعد از دترجنتSDS استفاده میشود. SDSبه اکثر پروتئین ها به میزانی اتصال می یابد که تقریبا متناسب با وزن ملکولی پروتئین است این میزان در حدود 1 SDSملکول برای هر دو ریشه اسید آمینه است .SDSاتصال یافته بار خالص منفی زیادی در پروتئین ایجاد می کند و با خنثی نمودن بار ابتدایی پروتئین ،به هر پروتئین نسبت مشابه بار به جرم می دهد از اینرو SDSسبب جداسازی پروتئین ها تنها بر اساس جرم آنها میشود.بطوریکه پپتید های کوچکتر حرکت سریع تر را پیدا میکنندو در پایین ژل قرار می گیرند.
بعد از الکتروفورز با افزودن یک رنگ که معمولا پروتئین اتصال یافته و به خود ژل اتصال نمی گردد پروتئین ها رویت می شوند.به هاین ترتیب میتوان پیشرفت یک تخلیص پروتئین را در نظر گرفت.
خوب اینم از پرونده الکتروفورز دوبعدی
با آرزوی موفقیت برای همه
منبع:lehninger principles of biochemistry
(دوستای گلم اگه این مطلب براتون مفید بود خواهشا حتما تو نظرات اعلام کنید و اگرهم جایی کم و کاستی هست بازم خواهش میکنم که کامنت بذارید تا منم یاد بگیرم.)
"استفاده از این مطلب با ذکر منبع بلامانع است"
مطالب مشابه :
الکتروفورز دو بعدی
الکتروفورز ژل در پروفایل نمودن پروتئین ها این دو روش ترکیب شده و الکتروفورز دوبعدی
پزوتئومیکس
الکتروفورز دو بعدی در تکنیک الکتروفورز دوبعدی، پروتئین ها در بعد اول با انجام ief
الکتروفورز دو بعدی چیست
این شگرد اساس پیشرفت و تکامل الکتروفورز دوبعدی را در 30 سال بعدی تشکیل داد به طوری که تا کنون
پروتئوم و پروتئومیک
الکتروفورز دوبعدی یکی از قویترین روشهای تفکیک پروتئینها است. در الکتروفورز دو بعدی، ابتدا
الکتروفورز دو بعدی چیست ؟
الکتروفورز دو بعدی چیست ؟ الكتروفورز روشي است كه در آن نمونه هايي که بار الکتريکي دارند
پروتئومیکس Proteomics
الکتروفورز دوبعدی-از
two-dimensional elechtrophoresis
همون طور که قبلا اشاره کردیم طی الکتروفورز 2 بعدی خوب اینم از پرونده الکتروفورز دوبعدی.
شاخه بندی شیمی تجزیه
Two dimensional electrophoresis الکتروفورز دوبعدی ۷-۴-۱-۱- Immunofixation electrophoresis الکتروفورز تحکیم ایمنی
برچسب :
الکتروفورز دوبعدی